Πώς να υπολογίσετε το RF
Υπάρχουν πολλές μέθοδοι διαχωρισμού και αναγνώρισης διαφορετικών ενώσεων. Χρωματογραφία είναι η επιστήμη που σας επιτρέπει να διαχωρίσετε τα συστατικά ενός μείγματος. Το Rf (μερικές φορές γράφεται ανεπίσημα ως "rf value") είναι μέρος αυτού.
Υπάρχουν πολλά διαφορετικά είδη χρωματογραφίας. Εδώ, το επίκεντρο είναι το απλούστερο είδος χρωματογραφίας:χρωματογραφία χαρτιού ή χρωματογραφία λεπτής στιβάδας (TLC). Και οι δύο χρησιμοποιούν την ίδια γενική διαδικασία, η οποία περιγράφεται παρακάτω.
Τι περιλαμβάνει η χρωματογραφία;
Όλοι οι τύποι χρωματογραφίας έχουν μια στάσιμη φάση και μια φάση για κινητά . Η στατική φάση, όπως ίσως μπορείτε να μαντέψετε από το όνομα, δεν κινείται. Στη χρωματογραφία χαρτιού, η στατική φάση είναι το ίδιο το χαρτί.
Για να ξεκινήσει ο διαχωρισμός των ενώσεων, η ουσία που πρόκειται να αναλυθεί είναι διακεκομμένη στην κάτω άκρη του κομματιού χαρτιού. Στη συνέχεια το χαρτί τοποθετείται σε ένα ποτήρι ζέσεως που περιέχει την κινητή φάση, η οποία είναι ένας διαλύτης. Ο διαλύτης πρέπει να βρίσκεται κάτω από το σημείο όπου είναι διακεκομμένη η ουσία για ανάλυση. Δεν πρέπει να βυθίζει την αναλυόμενη ουσία.
Το υγρό κινείται προς τα πάνω στο χαρτί με τριχοειδή δράση. Εάν η αναλυόμενη ουσία ή μέρος της αναλυόμενης ουσίας έλκεται από την κινητή φάση, θα κινηθεί μαζί της. Εάν έχει ισχυρότερη έλξη για τη στατική φάση, δεν θα κινηθεί.
Αφού ο διαλύτης έχει ανέβει στη στατική φάση σε κάποιο βαθμό, έχετε ένα χρωματογράφημα. Αυτό το χρωματογράφημα σας λέει κάτι για το διαχωρισμό διαφορετικών συστατικών σε ένα μείγμα ή σας λέει για την ουσία που έχετε. Πώς;
Διαχωρισμός και αναγνώριση εξαρτημάτων με χρήση χρωματογράμματος
Εάν οι συνθήκες για την ανάπτυξη ενός χρωματογράμματος είναι οι ίδιες, τότε η απόσταση που κινείται μια συγκεκριμένη ουσία θα πρέπει να αλλάξει. Αυτή η απόσταση μετριέται με τον τύπο παράγοντα διατήρησης ή Rf .
Ο τύπος του παράγοντα διατήρησης είναι:
Αυτή η τιμή θα πρέπει να είναι ίδια για μια ουσία όταν το χρωματογράφημα αναπτύσσεται με τον ίδιο τρόπο.
Αυτό είναι χρήσιμο όταν έχετε ένα μείγμα ουσιών.
Για παράδειγμα, ας πούμε ότι έχετε τέσσερα δείγματα:τρία είναι πρότυπα και ένα είναι μείγμα. Η δουλειά σας είναι να προσδιορίσετε ποια συστατικά υπάρχουν στο μείγμα.
Τι είναι τα πρότυπα; Τα πρότυπα είναι ένα καθαρό δείγμα μιας ουσίας. Αυτό μπορεί να εκτελεστεί στο χρωματογράφημα ως σύγκριση.
Το μείγμα μπορεί να τρέξει, μετά από το οποίο μπορείτε να προσδιορίσετε πόσο μακριά εκτελούνται τα διαφορετικά συστατικά του.
Ας πούμε ότι το Πρότυπο #1 έχει ισχυρή συγγένεια με το νερό (η κινητή φάση). Αυτό σημαίνει ότι θα ταξιδέψει στο χαρτί με την κινητή φάση. Το πρότυπο #2 από την άλλη πλευρά έχει ισχυρή συγγένεια με το χαρτί. Αυτό σημαίνει ότι θα μείνει με τη στατική φάση. Τέλος, το Πρότυπο #3 έχει συγγένεια τόσο με το νερό όσο και με το χαρτί. Προβλέπετε ότι θα μετακινηθεί ένα ενδιάμεσο ποσό.
Διαπιστώνετε ότι ο διαλύτης κινείται 5,7 cm, ενώ το Standard #1 κινείται 0,5 cm, το Standard #2 κινείται 4,8 cm και το Standard #3 κινείται 2,9 cm. Τι είναι τα Rf τιμές για κάθε πρότυπο;
Τώρα, γνωρίζετε το Rf αξίες για τα πρότυπα. Στη συνέχεια, σε ένα άλλο κομμάτι χαρτί τοποθετείτε μια κουκκίδα από το μείγμα και αφήνετε το χρωματογράφημα να αναπτυχθεί τοποθετώντας το σε νερό.
Μόλις αφαιρεθεί, διαπιστώνετε ότι υπάρχουν δύο τελείες που χωρίζονται από την αρχική κουκκίδα που τοποθετήσατε. Αυτό πιθανότατα σημαίνει ότι υπάρχουν μόνο δύο συστατικά στο μείγμα σας. Στη συνέχεια, πρέπει να υπολογίσετε σε ποια από τα πρότυπα αντιστοιχούν αυτά τα δύο στοιχεία. Για να το κάνετε αυτό, μετράτε το Rf τιμές.
Ο διαλύτης μετακινήθηκε 4,5 cm. Το ένα εξάρτημα (που ονομάζεται συστατικό 1) μετακινήθηκε 2,2 cm και το άλλο μετακινήθηκε 3,9 cm (που ονομάζεται συστατικό 2). Για να δείτε σε ποιο πρότυπο αντιστοιχούν αυτά τα στοιχεία, θα χρειαστεί να χρησιμοποιήσετε τον τύπο του παράγοντα διατήρησης για να υπολογίσετε το Rf τιμές.
Λαμβάνοντας υπόψη αυτά τα Rf τιμές, είναι πιθανό ότι το στοιχείο 1 αντιστοιχεί στο Πρότυπο #3 αφού το Rf οι τιμές είναι πολύ παρόμοιες. Το στοιχείο 2 είναι πιθανότατα Standard #2.
