Αντιδραστήριο Schiff και δοκιμή

Η δοκιμή Schiff είναι μια χημική μέθοδος για τον προσδιορισμό του εάν μια αναλυόμενη ουσία περιέχει ή όχι αλδεΰδες. Αυτό επιτυγχάνεται με την ανάμειξη μικρής ποσότητας αντιδραστηρίου Schiff με την αναλυόμενη ουσία (που είναι το προϊόν που σχηματίζεται σε ορισμένες αντιδράσεις σύνθεσης βαφής όπως η αντίδραση μεταξύ όξινου θειώδους νατρίου και φουξίνης). Το αντιδραστήριο Schiff, η δοκιμή Schiff, ο τύπος αντιδραστηρίου Schiff, η δοκιμή αντιδραστηρίου Schiff, η προετοιμασία αντιδραστηρίου Schiff, η δομή Rosaline και η δοκιμή Schiff για αλδεΰδες καλύπτονται όλα σε αυτό το άρθρο.

Σχετικά με τη δοκιμή του Schiff 

Το τεστ Schiff είναι ένα μάλλον γενικό χημικό τεστ για την ταυτοποίηση πολυάριθμων οργανικών αλδεΰδων που έχουν επίσης βρει χρησιμότητα στη χρώση βιολογικών ιστών. Εφευρέθηκε από τον Hugo Schiff στην πρώιμη οργανική χημεία. Το αντιδραστήριο Schiff είναι το προϊόν αντίδρασης μιας σύνθεσης βαφής όπως η φουξίνη και το όξινο θειώδες νάτριο. Οι εναλλακτικές χρωστικές όπως η παραροσανιλίνη (η οποία στερείται αρωματικής μεθυλικής ομάδας) και η νέα φουξίνη (η οποία είναι ομοιόμορφα μονομεθυλιωμένη ορθο με τις λειτουργίες αμίνης της βαφής) δεν έχουν συγκρίσιμη χημεία ανίχνευσης.

Όταν το άγνωστο υλικό δίνεται στο αποχρωματισμένο αντιδραστήριο Schiff ως ποιοτική δοκιμή για αλδεΰδες, εμφανίζεται ένα χαρακτηριστικό ματζέντα χρώμα όταν υπάρχει αλδεΰδη. Διάφορες διαδικασίες βιολογικής χρώσης ιστών, όπως η χρώση Feulgen και η χρώση με περιοδικό οξύ-Schiff, χρησιμοποιούν χημικές ουσίες τύπου Schiff. Τα άκρα των σακχαριτών στο ανθρώπινο δέρμα περιέχουν επίσης λειτουργικές ομάδες αλδεΰδης, επομένως αποχρωματίζονται.

Σύνθεση του τεστ του Schiff 

Ο χημικός τύπος του αντιδραστηρίου είναι C19H21N3S2O7.4H2O

Το αντιδραστήριο αποτελείται από:

Νερό (H2O)>98%

• Υδροχλωρικό οξύ (HCl) <1%
• Μεταδιθειώδες νάτριο <1%
• Βασική υδροχλωρική φουξίνη <1%

Το διάλυμα ανακινείται σε τακτά χρονικά διαστήματα πριν αποχρωματιστεί με κάρβουνο. Μετά από αυτό, το μείγμα διηθείται. Για να εξασφαλιστεί η παραγωγή ενός εντελώς άχρωμου διαλύματος, πρέπει να χρησιμοποιηθεί φρέσκος ενεργός άνθρακας. Εάν το διάλυμα δεν είναι άχρωμο, φιλτράρεται ξανά.

Προετοιμασία αντιδραστηρίου 

Τα παρακάτω είναι τα συγκεκριμένα βήματα στη διαδικασία προετοιμασίας:

• 5 g βασικό φούξιν, διαλυμένο σε 900 ml βραστό νερό
• Ψύξτε το διάλυμα μέχρι να φτάσει σε θερμοκρασία περίπου 50°C
• Ρίξτε αργά 100 ml 1M HCl στο αραιωμένο διάλυμα φουξίνης
• Μειώστε ξανά τη θερμοκρασία του διαλύματος στους 25°C
• 10 g K2S2O5 πρέπει να προστεθούν στο ψυχρό διάλυμα
• Ανακινήστε το προαναφερθέν διάλυμα για 3 λεπτά πριν το βάλετε σε σκοτεινή περιοχή για επώαση για 24 ώρες
• Προσθέστε 5 g λεπτού ενεργού άνθρακα στο μείγμα αντίδρασης αφού επωαστεί και ξεκουραστεί
• Διηθήστε το διάλυμα μετά από 3 λεπτά ανακίνησης
• Απαιτείται εκ νέου διήθηση και επανεπεξεργασία εάν δεν μπορεί να ληφθεί ένα κρυστάλλινο διαυγές διάλυμα
• Σε ένα φιαλίδιο καλυμμένο με φύλλο, διατηρήστε το παρασκευασμένο διάλυμα στους 4°C
• Εάν το αντιδραστήριο Schiff δεν αποθηκευτεί σωστά, θα καταβυθιστεί ένα λευκό κρυσταλλικό υλικό
• Ως αποτέλεσμα, οι φρέσκες παρτίδες πρέπει να προετοιμάζονται κάθε 2-3 εβδομάδες για να διασφαλίζονται ακριβή ευρήματα

Μηχανισμός δοκιμής Schiff 

Το όξινο θειώδες άλας και η παρα-ροσανιλίνη αντιδρούν για να σχηματίσουν ένα αποχρωματισμένο προϊόν προσθήκης με ένα σουλφονωμένο κεντρικό άνθρακα. Τώρα, οι ελεύθερες και αφόρτιστες ομάδες αμίνης του αρωματικού δακτυλίου συνδυάζονται με την ομάδα αλδεΰδης για να δημιουργήσουν μια αλδιμίνη. Επειδή η ομάδα αλδιμίνης είναι ένα ισχυρό ηλεκτρόφιλο, διεξάγει μια δεύτερη αντίδραση με το όξινο θειώδες ιόν. Τέλος, σχηματίζεται ένα διθειώδες προϊόν προσθήκης μωβ ή ματζέντα χρώματος.

Συμπέρασμα 

Το αποτέλεσμα αρκετών διαδικασιών σύνθεσης βαφής, όπως η αντίδραση μεταξύ όξινου θειώδους νατρίου και φούξινης, είναι το αντιδραστήριο Schiff. Χρησιμοποιείται για να διαπιστωθεί εάν υπάρχει αλδεΰδη σε μια αναλυόμενη ουσία. Μπορεί να βοηθήσει στη διάκριση μεταξύ αλδεΰδων και κετονών. Το όξινο θειικό νάτριο αποχρωματίζει τη φουσσίνη ή την υδροχλωρική ροζανιλίνη, μια βαφή με ματζέντα χρώματος με μοριακό τύπο C19H21N3S2O7.4H2O.