Εκτεθειμένη ταυτότητα:Μικροπλαστικά κάτω από το μικροσκόπιο Raman

Το θέμα της ρύπανσης από μικροπλαστικά προκαλεί σοβαρή ανησυχία μεταξύ των επιστημόνων και της κοινωνίας γενικότερα. Τα μικροπλαστικά, μικροσκοπικά πλαστικά θραύσματα μεγέθους από 1 μικρό έως 5 χιλιοστά, έχουν βρει το δρόμο τους σε διάφορα χερσαία και υδάτινα περιβάλλοντα, θαλάσσιους οργανισμούς και ακόμη και καταναλωτικά προϊόντα, συμπεριλαμβανομένων των τροφίμων και των ποτών.

Είναι τα μικροπλαστικά πραγματική απειλή;

Οι κίνδυνοι που ενέχει η έκθεση σε μικροπλαστικά αποτελούν αντικείμενο συνεχούς συζήτησης, καθώς οι πιθανές αρνητικές επιπτώσεις εξαρτώνται από τη δόση και το μέγεθος, με ορισμένους να υποστηρίζουν ότι, επί του παρόντος, η χαμηλή συγκέντρωση μικροπλαστικών στο οικοσύστημα είναι πιθανώς ασφαλής και δεν δικαιολογεί άμεση δράση. Ωστόσο, το πραγματικό επίπεδο έκθεσης μπορεί να είναι μεγαλύτερο από τις τρέχουσες εκτιμήσεις που μας κάνουν να πιστεύουμε , καθώς αυτές οι εκτιμήσεις βασίζονται σε μελέτες που συνήθως παραμελούν έναν μεγάλο πληθυσμό μικροπλαστικών:τα πολύ μικρά.

Τα πολύ μικρά μικροπλαστικά (1 – 50 microns) είναι δυνητικά τα πιο επικίνδυνα, καθώς έχουν περισσότερες πιθανότητες να διεισδύσουν στον φραγμό του εντέρου. Σύμφωνα με μια πρόσφατη ανασκόπηση, το ένα τρίτο των μελετών αναγνώρισης μικροπλαστικών βασίζεται μόνο στην οπτική επιθεώρηση για να ανιχνεύσει εάν ένα σωματίδιο είναι πλαστικό ή φυσικής προέλευσης, μια στρατηγική που σταδιακά αποτυγχάνει καθώς το μέγεθος των σωματιδίων μειώνεται και δεν συνιστάται για σωματίδια μικρότερα από 500 μικρά. Ευτυχώς, σχεδόν οι μισές από τις μελέτες χρησιμοποιούν φασματοσκοπία υπέρυθρης ακτινοβολίας, μια τεχνική χημικής ταυτοποίησης ικανή να προσδιορίσει την πολυμερική σύνθεση σωματιδίων όχι μικρότερα από 15-20 μικρά. Ωστόσο, η λογιστική για μικροπλαστικά μικρότερα από 20 μικρά αποδεικνύεται κρίσιμη.

Η Raman δεν αφήνει τα μικρά μικροπλαστικά να γλιστρήσουν κάτω από το ραντάρ

Η φασματοσκοπία Raman, μια εναλλακτική λύση στο FTIR, προσφέρει χωρική ανάλυση έως και 1 micron και, όταν συνδέεται με ένα οπτικό μικροσκόπιο (μικροσκόπιο Raman), είναι η μόνη συνιστώμενη μέθοδος για την αναγνώριση μικροπλαστικών μεγέθους κάτω των 20 μικρών. Η ανάλυση Raman των μικροπλαστικών βρίσκεται στο Το θαλασσινό νερό και το γλυκό νερό αναφέρουν ότι περισσότερα από τα μισά από τα σωματίδια του δείγματος είναι μικρότερα από 40 μικρά και η κατανομή τους ακολουθεί έναν νόμο ισχύος, όπου ο πληθυσμός αυξάνεται γρήγορα καθώς μειώνεται το μέγεθος (Εικόνα 1). Ένα άλλο αποθαρρυντικό παράδειγμα είναι η εργασία της Darena Schymanski και των συνεργατών της, οι οποίοι ανέλυσαν μικροπλαστικά που υπάρχουν σε εμφιαλωμένο νερό, διαπιστώνοντας ότι το 80% αυτών ανήκουν στην κατηγορία <20 micron - και θα χάνονταν εντελώς από μια ανάλυση FTIR. Είναι λοιπόν σαφές ότι οι τεχνικές Raman είναι απαραίτητες για την επίτευξη αντιπροσωπευτικών εκτιμήσεων της συγκέντρωσης μικροπλαστικών, ωστόσο επί του παρόντος μόνο το 13% των μελετών αναγνώρισης μικροπλαστικών χρησιμοποιούν μικροσκοπία Raman.

Περιθώριο βελτίωσης

Το FTIR και το Raman μοιράζονται πολλά θετικά χαρακτηριστικά – και τα δύο είναι σχετικά φθηνά, μη καταστροφικά και απαιτούν μικρή ποσότητα δείγματος. Παρά την υψηλότερη χωρική του ανάλυση, το Raman παραμένει μη δημοφιλές, σε σχέση με το FTIR, εν μέρει λόγω της κακής ποιότητας σήματος του. Από τη μία πλευρά, το σήμα Raman είναι εγγενώς αδύναμο, αφού μόνο ένα μικροσκοπικό κλάσμα (10) φωτονίων που βομβαρδίζουν το δείγμα μεταφράζονται στην πραγματικότητα στο σήμα Raman. Επομένως, ένα καλής ποιότητας φάσμα Raman απαιτεί μεγαλύτερο χρόνο ανάλυσης από ένα φάσμα FTIR του ίδιου δείγματος. Επιπλέον, ο φθορισμός που προέρχεται από οργανικές ακαθαρσίες, χρωστικές ουσίες και άλλα πρόσθετα έχει ως αποτέλεσμα μια αυξημένη γραμμή βάσης φάσματος που συχνά επισκιάζει τα σήματα Raman του υποκείμενου πολυμερούς εμποδίζοντας την αναγνώρισή του. Προκειμένου να ξεπεραστούν αυτά τα μειονεκτήματα και να καταστήσουν το μικροσκόπιο Raman πιο ελκυστικό για χρήση σε μεγάλη κλίμακα, ερευνητές στον τομέα της αναγνώρισης μικροπλαστικών έχουν προτείνει μια ποικιλία από ενδιαφέρουσες λύσεις, όπως συνοψίζονται σε μια πρόσφατη ανασκόπηση .

Αυξάνεται πάνω από τον θόρυβο

Μια κοινή διαδικασία για τη μείωση του φθορισμού που προέρχεται από οργανικές ακαθαρσίες (και ορισμένες οργανικές βαφές) είναι η αφαίρεσή τους σε ένα στάδιο πέψης (με οξύ, βάση, οξειδωτικά μέσα…), πριν από την ανάλυση. Ωστόσο, η πέψη δεν αφαιρεί όλους τους παράγοντες που προκαλούν φθορισμό που συναντώνται συνήθως στα μικροπλαστικά. Για αυτές τις περιπτώσεις, μια έξυπνη λύση μπορεί να είναι η διαδικασία που προτείνεται από τον Ghosal και τους συνεργάτες του, οι οποίοι χρησιμοποιούν έναν αυτοματοποιημένο αλγόριθμο για να αφαιρέσουν το φόντο του φθορισμού και να αποκαλύψουν το υποκείμενο φάσμα πολυμερών, όπως φαίνεται στο Σχήμα 2. Όσο για την εγγενή αδυναμία του σήματος Raman, μια πιθανή λύση είναι η χρήση ενός ανιχνευτή εξοπλισμένου με πολλαπλασιαστή ηλεκτρονίων, ο οποίος ενισχύει το σήμα πριν από την ανάγνωση, μειώνοντας έτσι τον χρόνο που απαιτείται για την επίτευξη μιας αξιοπρεπούς αναλογίας σήματος προς θόρυβο.

Αφήστε τα μηχανήματα να κάνουν τη βρώμικη δουλειά

Πριν γίνει πραγματικότητα η μεγάλης κλίμακας παρακολούθηση μικροπλαστικών με χρήση micro-Raman (ή micro-FTIR), πρέπει να ξεπεραστεί μια μεγάλη πρόκληση:πώς να αντιμετωπίσουμε τον μεγάλο όγκο των σωματιδίων που θα αναλυθούν και τον προκύπτοντα αριθμό φασμάτων, τα οποία πρέπει να να συγκριθεί μεμονωμένα με τα φάσματα αναφοράς μέχρι να βρεθεί αντιστοιχία; Μια προφανής απάντηση είναι η αυτοματοποίηση. Σε μια πλήρως αυτοματοποιημένη ανάλυση, ένα φίλτρο που περιέχει μικροπλαστικά (μαζί με μη πλαστικό υλικό) τοποθετείται κάτω από το μικροσκόπιο, στη συνέχεια ένα λογισμικό επεξεργασίας εικόνας εντοπίζει τα σωματίδια και ένα μηχανοκίνητο στάδιο τοποθετεί το επιλεγμένο σωματίδιο κάτω από το λέιζερ Raman. Το φάσμα του δείγματος συλλέγεται και συγκρίνεται γρήγορα με μια βιβλιοθήκη φασμάτων αναφοράς από εμπορικά πολυμερή μέχρι να βρεθεί μια αρκετά καλή αντιστοίχιση και να αναγνωριστεί το σωματίδιο – ενώ ο χειριστής είναι ελεύθερος να κάνει άλλες εργασίες. Ακολουθώντας μια παρόμοια στρατηγική, η Laura Frère και οι συνεργάτες της ανέλυσαν 110 σωματίδια σε λιγότερο από 3 ώρες και εντόπισαν επιτυχώς το 75% από αυτά (το 71% ήταν πράγματι πλαστικής φύσης ενώ το 4% ήταν ανόργανα σωματίδια). Το υπόλοιπο 25% δεν ήταν δυνατό να εντοπιστεί λόγω της παρεμβολής του φθορισμού, της παρουσίας χρωστικών των οποίων το φάσμα καλύπτει αυτό του πολυμερούς ή της αδυναμίας εύρεσης φασματικής αντιστοίχισης στη βάση δεδομένων αναφοράς.

Επέκταση της βάσης δεδομένων

Για να είναι επιτυχής η αυτοματοποιημένη φασματική αναγνώριση (ταύτιση βιβλιοθήκης), η βιβλιοθήκη αναφοράς πρέπει να είναι ολοκληρωμένη, συμπεριλαμβανομένης όχι μόνο των φασμάτων των παρθένων πολυμερών αλλά και εκείνων των κοινών πλαστικών πρόσθετων, χρωστικών ουσιών, πληρωτικών κ.λπ. Ιδανικά, η βάση δεδομένων θα περιλαμβάνει επίσης αναφορά φάσματα μικροπλαστικών που βρίσκονται στο περιβάλλον των οποίων οι πολυμερείς αλυσίδες συχνά αποικοδομούνται από τις καιρικές διεργασίες με αποτέλεσμα φάσματα που μπορεί να διαφέρουν πολύ από αυτά του παρθένου πολυμερούς. Δυστυχώς, οι εμπορικές βιβλιοθήκες δεν περιλαμβάνουν φάσματα αναφοράς από διαβρωμένα μικροπλαστικά, έτσι ώστε οι ερευνητές να πρέπει να συλλέξουν τα δικά τους και να τα προσθέσουν χειροκίνητα σε μια προσαρμοσμένη βάση δεδομένων. Αυτή η διαδικασία είναι απαγορευτικά χρονοβόρα και ένας έξυπνος τρόπος κατανομής του φορτίου και αποφυγής της επανάληψης θα ήταν η δημιουργία μιας βάσης δεδομένων ανοιχτού κώδικα φασμάτων Raman. Ένα έργο αυτού του είδους υπάρχει ήδη για τη φασματοσκοπία μάζας με τη μορφή Curatr , μιας διαδικτυακής εφαρμογής όπου εξουσιοδοτημένοι επιμελητές μπορούν να ανεβάσουν τα φάσματα τους, τα οποία στη συνέχεια μετατρέπονται σε μορφή συμβατή με λογισμικό αντιστοίχισης βιβλιοθήκης, ώστε οποιοσδήποτε χρήστης να μπορεί να τα κατεβάσει και να τα χρησιμοποιήσει ελεύθερα – μια ιδέα που ίσως θέλει να υιοθετήσει η κοινότητα Raman.

Μελλοντικές οδοί για την αναγνώριση μικροπλαστικών

Παρόλο που υπάρχει ακόμα αρκετός χώρος για βελτιστοποίηση, το εγγενώς αδύναμο σήμα της συμβατικής (αυθόρμητης) φασματοσκοπίας Raman αποτελεί μεγάλο εμπόδιο για την εφαρμογή της σε εξαιρετικά γρήγορη, σε πραγματικό χρόνο παρακολούθηση ρεόντων μικροπλαστικών. Μια τέτοια προσπάθεια απαιτεί μια ταχύτερη τεχνική και η απάντηση μπορεί να βρίσκεται στη διεγερμένη φασματοσκοπία Raman (SRS). Το SRS χρησιμοποιεί δύο ακτίνες λέιζερ εστιασμένες στο δείγμα για να δημιουργήσει ένα σήμα που είναι τάξεις μεγέθους υψηλότερο από το αυθόρμητο σήμα Raman – επομένως ο χρόνος λήψης μειώνεται σημαντικά. Ο Liron Zada ​​και οι συνεργάτες του ήταν οι πρώτοι που εφάρμοσαν το SRS στην ανίχνευση περιβαλλοντικών μικροπλαστικών (Εικ. 3). Ως απόδειξη αρχής, οι συγγραφείς σάρωσαν 1 cm περιοχής φίλτρου, χωρίς καμία προεπιλογή σωματιδίων, χρησιμοποιώντας SRS επιτυγχάνοντας συνολικό χρόνο ανάλυσης 4,5 ωρών ενώ η ίδια διαδικασία σάρωσης χρησιμοποιώντας αυθόρμητη σκέδαση Raman θα διαρκούσε 116 ημέρες. Ο συνδυασμός αυτοματοποιημένης αναζήτησης σωματιδίων και SRS θα μπορούσε να επιταχύνει σημαντικά τη διαδικασία.

Μια άλλη πολλά υποσχόμενη οδός έρευνας είναι ο συνδυασμός κυτταρομετρίας ροής με SRS για την ανίχνευση ταχέως κινούμενων σωματιδίων, όπως έγινε από τον Chi Zhang και τους συνεργάτες του, του οποίου ο προσαρμοσμένος ενισχυτής σήματος επιτρέπει τη συλλογή ενός φάσματος SRS σε μόλις 5 μικροδευτερόλεπτα. Η συσκευή κυτταρομετρίας ροής-SRS έκανε διάκριση μεταξύ σφαιριδίων πολυστυρενίου και πολυ(μεθακρυλικού μεθυλεστέρα) (10 μικρά) που ρέουν στο νερό με ρυθμό 11 000 σφαιριδίων ανά δευτερόλεπτο. Ένα άλλο ενδιαφέρον παράδειγμα ανάλυσης σε πραγματικό χρόνο είναι το φορητό μικροσκόπιο SRS που προτείνεται από τον Liao και τους συνεργάτες του, το οποίο επιτρέπει την απεικόνιση με ρυθμό 8 καρέ ανά δευτερόλεπτο.

Καθώς οι τεχνικές Raman γίνονται πιο γρήγορες, πιο ευαίσθητες και ικανές να επεξεργάζονται υψηλής απόδοσης την εφαρμογή τους σε μεγάλη κλίμακα, η παρακολούθηση των μικροπλαστικών σε πραγματικό χρόνο είναι πιθανό να γίνει πραγματικότητα.

Αυτά τα ευρήματα περιγράφονται στο άρθρο με τίτλο Identification of microplastics using Raman spectroscopy:Latest developments and future prospects, που δημοσιεύτηκε πρόσφατα στο περιοδικό Water Research. Αυτή η εργασία διεξήχθη από Catarina F. Araujo, Mariela M. Nolasco, Antonio M.P. Ribeiro και Paulo J.A. Ribeiro-Claro από το Universidade de Aveiro.

Αναφορές:

1. Avio, C. G.; Gorbi, S.; Regoli, F. Plastics and Microplastics in the Oceans:From Emerging Pollutants to Emered Threat. Blue Growth Mar. Environ. Saf. 2017 , 128, 2–11.
2. Horton, A. A.; Walton, Α.; Spurgeon, D. J.; Lahive, Ε.; Svendsen, C. Microplastics in Freshwater and Terrestrial Environments:Evaluating the Current Understanding to Identify the Knowledge Gaps and Future Research Priorities. Sci. Σύνολο Περιβάλλοντος. 2017 , 586, 127–141.
3. Ivleva, N. P.; Wiesheu, Α. C.; Niessner, R. Microplastic in Aquatic Ecosystems. Angew. Chem.-Int. Εκδ. 2017 , 56 (7), 1720–1739.
4. Lots, F. A. E.; Behrens, Ρ.; Vijver, Μ. G.; Horton, Α. Α.; Bosker, T. A Large-Scale Investigation of Microplastic Contamination:Abundance and Characteristics of Microplastics in European Beach Sediment. Μαρ. Ρύπανση. Ταύρος. 2017 , 123 (1–2), 219–226.
5. Lusher, A. L.; Welden, Ν. Α.; Sobral, Ρ.; Cole, M. Δειγματοληψία, απομόνωση και ταυτοποίηση μικροπλαστικών που καταπίνονται από ψάρια και ασπόνδυλα. Πρωκτικός. Μέθοδοι 2017 , 9 (9), 1346–1360.
6. Καραμί, Α.; Golieskardi, Α.; Choo, C. K.; Larat, V.; Karbalaei, S.; Salamatinia, B. Microplastic and Mesoplastic Contamination σε Κονσερβοποιημένες Σαρδέλες και Sprats. Sci. Σύνολο Περιβάλλοντος. 2018 , 612, 1380–1386.
7. Καραμί, Α.; Golieskardi, Α.; Choo, C. K.; Larat, V.; Galloway, T. S.; Salamatinia, B. The Presence of Microplastics in Commercial Salts from Different Countries. Sci. Απ. 2017 , 7, 46173.
8. Καραμί, Α.; Golieskardi, Α.; Ho, Υ. Β.; Larat, V.; Salamatinia, B. Microplastics in Eviscerated Flesh and Excised Organs of Dried Fish. Sci. Απ. 2017 , 7, 5473.
9. Schymanski, D.; Goldbeck, C.; Humpf, H.-U.; Fürst, P. Analysis of Microplastics in Water by Micro-Raman Spectroscopy:Release of Plastic Particles from Different Packaging into Mineral Water. Water Res. 2018 , 129 (Συμπλήρωμα Γ), 154–162.
10. Backhaus, T.; Wagner, M. Microplastics in the Environment:Πολλή φασαρία για το τίποτα; Μια Συζήτηση. PeerJ Prepr. 2018 , 6, e26507v6.
11. Burton, G. A. Οι εκθέσεις σε στρεσογόνους παράγοντες καθορίζουν τον κίνδυνο:Λοιπόν, γιατί οι συνάδελφοι επιστήμονες συνεχίζουν να εστιάζουν στον επιφανειακό κίνδυνο μικροπλαστικών; Περιβάλλω. Sci. Τεχνολ. 2017 , 51 (23), 13515–13516.
12. Conkle, J. L.; Del Valle, C. D. B.; Turner, J. W. Υποτιμούμε τη μόλυνση από μικροπλαστικά σε υδάτινα περιβάλλοντα; Περιβάλλω. Διαχειρίζονται. 2018 , 61 (1), 1–8.
13. Alexander, J.; Barregard, L.; Bignami, Μ.; Ceccatelli, S.; Cottrill, Β.; Dinovi, Μ.; Edler, L.; Grasl-Kraupp, Β.; Hogstrand, C.; Hoogenboom, L.; et al. Παρουσία Μικροπλαστικών και Νανοπλαστικών στα Τρόφιμα, με Ιδιαίτερη Εστίαση στα Θαλασσινά. Efsa J. 2016 , 14 (6), UNSP 4501.
14. Renner, G.; Schmidt, T. C.; Schram, J. Αναλυτικές Μεθοδολογίες για την Παρακολούθηση Μικρο(Νανο) Πλαστικών:Ποια είναι κατάλληλα για Σκοπό; Micro Nanoplastics Ed. Dr Teresa AP Rocha-St. 2018 , 1, 55–61.
15. Enders, K.; Lenz, R.; Stedmon, C. Α.; Nielsen, T. G. Αφθονία, μέγεθος και σύνθεση πολυμερούς θαλάσσιων μικροπλαστικών>=10 Mu m στον Ατλαντικό Ωκεανό και η μοντελοποιημένη κατακόρυφη κατανομή τους. Μαρ. Ρύπανση. Ταύρος. 2015 , 100 (1), 70–81.
16. Erni-Cassola, G.; Gibson, Μ. Ι.; Thompson, R. C.; Christie-Oleza, J. A. Lost, but Found with Nile Red:A Novel Method for Detecting and Quantifying Small Microplastics (1 Mm to 20 Mu m) in Environmental Samples. Περιβάλλω. Sci. Τεχνολ. 2017 , 51 (23), 13641–13648.
17. Ribeiro-Claro, P.; Nolasco, Μ. Μ.; Araújo, C. Κεφάλαιο 5 – Χαρακτηρισμός Μικροπλαστικών με Φασματοσκοπία Raman. Στην Περιεκτική Αναλυτική Χημεία; Rocha-Santos, T. A. P., Duarte, A. C., Eds.; Χαρακτηρισμός και Ανάλυση Μικροπλαστικών; Elsevier, 2017; Τομ. 75, σελ. 119–151.
18. Araujo, C. F.; Nolasco, Μ. Μ.; Ribeiro, Α. Μ. Ρ.; Ribeiro-Claro, P. J. A. Identification of Microplastics Using Raman Spectroscopy:Latest Developments and Future Prospects. Water Res. 2018 , 142, 426–440.
19. Miller, M. E.; Kroon, F. J.; Motti, C. A. Recovering Microplastics from Marine Samples:A Review of Current Practices. Μαρ. Ρύπανση. Ταύρος. 2017 , 123 (1–2), 6–18.
20. Silva, A. B.; Bastos, A. S.; Justino, C. I. L.; da Costa, J. P.; Duarte, A. C.; Rocha-Santos, T. A. P. Microplastics in the Environment:Challenges in Analytical Chemistry – A Review. Πρωκτικός. Chim. Acta 2018 .
21. Ghosal, S.; Chen, Μ.; Wagner, J.; Wang, Ζ.-Μ.; Wall, S. Molecular Identification of Polymers and Anthropogenic Particles Extracted from Oceanic Water and Fish Stomach – A Raman Micro-Spectroscopy Study. Περιβάλλω. Ρύπανση. 2018 , 233, 1113–1124.
22. Dieing, T.; Hollricher, O. Ομοεστιακή απεικόνιση Raman υψηλής ανάλυσης, υψηλής ταχύτητας. Vib. Spectrosc. 2008 , 48 (1), 22–27.
23. Frere, L.; Paul-Pont, Ι.; Moreau, J.; Soudant, Ρ.; Lambert, C.; Huvet, Α.; Rinnert, E. A Semi-Automated Raman Micro-Spectroscopy Method for Morphological and Chemical Characterizations of Microplastic Litter. Μαρ. Ρύπανση. Ταύρος. 2016 , 113 (1–2), 461–468.
24. Lenz, R.; Enders, Κ.; Stedmon, C. Α.; Mackenzie, D. M. A.; Nielsen, T. G. A Critical Assessment of Visual Identification of Marine Microplastic Using Raman Spectroscopy for Analysis Improvement. Μαρ. Ρύπανση. Ταύρος. 2015 , 100 (1), 82–91.
25. Palmer, A.; Phapale, Ρ.; Fay, D.; Alexandrov, T. Curatr:A Web Application for Creating, Curating and Sharing a Mass Spectral Library. Βιοπληροφορική 2017 , btx786–btx786.
26. Ελάχιστο, Δ.; Freudiger, C. W.; Lu, S.; Xie, X. S. Coherent Nonlinear Optical Imaging:Beyond Fluorescence Microscopy. Annu. Σεβ. Phys. Chem. 2011 , 62 (1), 507–530.
27. Zada, L.; Leslie, Η. Α.; Vethaak, Α. D.; Tinnevelt, G.; Janssen, J.; Boer, J. F. de; Ariese, F. Fast Microplastics Identification with Stimulated Raman Scattering Microscopy. J. Raman Spectrosc. 2018 .
28. Zhang, C.; Huang, K.-C.; Rajwa, Β.; Li, J.; Yang, S.; Lin, Η.; Liao, C.; Eakins, G.; Kuang, S.; Patsekin, V.; et al. Διεγερμένη κυτταρομετρία ροής σκέδασης Raman για ανάλυση ενός σωματιδίου χωρίς ετικέτα. Optica 2017 , 4 (1), 103–109.
29. Liao, C.-S.; Wang, Ρ.; Huang, C. Y.; Lin, Ρ.; Eakins, G.; Bentley, R. T.; Liang, R.; Cheng, J.-X. In Vivo και in Situ Φασματοσκοπική Απεικόνιση με Χειροκίνητο Διεγερμένο Μικροσκόπιο Σκέδασης Raman. ACS Photonics 2017 .